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BGC823/adr人胃癌阿霉素耐藥株
特(te)性:
安全(quan)性:所有(you)腫瘤和病毒轉染的細(xi)胞(bao)均視(shi)為有(you)潛在(zai)的生(sheng)(sheng)物危害性,必須(xu)在(zai)二級生(sheng)(sheng)物安全(quan)臺內操作(zuo),并請注(zhu)意(yi)防護,所有(you)廢(fei)液及接觸過此(ci)細(xi)胞(bao)的器皿需高(gao)壓滅(mie)菌后(hou)方能(neng)丟棄。收(shou)到細(xi)胞(bao)后(hou),在(zai)倒置鏡下*好(hao)是在4X物鏡(jing))觀察(cha)整個細胞生長(chang)情(qing)況。
(一)如果(guo)細胞未(wei)長滿(man),用75%酒精(jing)噴(pen)灑整(zheng)個瓶消毒后(hou)放到超菌臺內,嚴(yan)格無菌操作,打(da)開(kai)細胞(bao)培養瓶,吸出培養液,換 10ml新鮮培養(yang)液后繼續培養(yang)。(二)如果細胞已長(chang)滿(man),即可進行傳(chuan)代培養。具體步驟如下:
1. 棄去培養(yang)液,用PBS(不含鈣,鎂(mei)離子)洗1-2次。
2. 加1ml消(xiao)化液(ye)(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培養瓶中,倒放于(yu)37℃培養箱(xiang)1-3分鐘預熱,之(zhi)后翻轉培養瓶(ping)10-30秒后(hou),在倒置顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)消化情況,若細胞(bao)大部分變(bian)圓,迅(xun)速(su)拿回操作臺(tai),輕敲幾下培養(yang)(yang)瓶后(hou)加少量*培養(yang)(yang)基終(zhong)止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養基,輕輕打勻后吸出一半,分到新的培養瓶中。如果沒有特別說明,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項:
1、觀察細胞(bao)在低倍(bei)鏡(4或5X物(wu)鏡)下進行,否則不能準(zhun)確判斷細(xi)胞的(de)傳(chuan)代密度。看細(xi)胞的(de)形(xing)態請(qing)在10X或20X物鏡下(xia)。
2、瓶(ping)中運輸培養基不能重(zhong)復再用,請換用(yong)加雙抗的新(xin)培養基,細(xi)胞凍存后,培養基中可不加任何抗生素(su)。
3、有些(xie)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁不牢,如發現(xian)貼(tie)壁細(xi)胞(bao)有脫落,可離心(xin)吹打后接種(zhong)到(dao)新瓶內。
4、收(shou)到細胞后,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請及時(shi)與我(wo)們。
BGC823/adr人胃癌阿霉素耐藥株
其他服務(wu)項目(mu):
服務(wu)領域 | 服務內容 |
分(fen)子生物學實驗 | 熒光定量PCR、慢病毒/腺病毒包裝、化學合成序列、全基因合成、原位雜交、甲基化 |
細胞生物學實驗 | 細(xi)胞(bao)(bao)分離和(he)鑒定、細(xi)胞(bao)(bao)耐(nai)藥株構建(jian)、細(xi)胞(bao)(bao)共培養、外泌體(ti)提取、穩轉株的(de)構建(jian) |
蛋(dan)白相關形態實(shi)驗 | 蛋白表達檢測:Western blot;免疫組化 (IHC)、免疫組化芯片、免疫熒光(IF)、激光共聚焦拍片、 Elisa檢測 |
動物模(mo)型實驗 | 成瘤實(shi)驗(yan)(yan):裸鼠成瘤實(shi)驗(yan)(yan)、原位接種成瘤實(shi)驗(yan)(yan) |
DNA/RNA/蛋白相互作(zuo)用研究實驗 | 雙熒光素酶驗證實驗、免疫沉淀(IP)、免疫共沉淀(Co-IP)、染色質免疫共沉淀技術(ChIP)、RIP技術(RNA結合蛋白免疫沉淀)、EMSA實驗、RNA pull down |
高通量分析實(shi)驗 | 高(gao)通(tong)量測序、蛋白質組學 |