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細胞Hoechst凋亡染色

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更新時間: 2018-10-17

Hoechst是一類DNA染料,與DNA雙(shuang)鏈中的(de)(de)小溝(gou)(minor groove)結合(he),可(ke)穿過細胞膜(mo),可(ke)結合(he)于(yu)活細胞或固定(ding)過的(de)(de)細胞,因此可(ke)用于(yu)活細胞標記,可(ke)用熒光顯微(wei)鏡檢測形態學的(de)(de)細胞凋亡(wang)情況。

產品介紹:

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服務簡介:
Hoechst染料(liao)都(dou)可在350nm左右的紫外光激發。都(dou)在461nm處發出(chu)藍靛色(se)(se)(se)熒光光。Hoechst染色(se)(se)(se)時無需用(yong)DAB來顯色(se)(se)(se),它直接(jie)結合(he)細(xi)胞的DNA ,經過紫外光激發后發出(chu)藍色(se)(se)(se)熒光。
服務原理:
Hoechst是可以穿透細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)的(de)藍(lan)(lan)色(se)熒(ying)光(guang)染(ran)料,對細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)毒(du)性較 低。 熒(ying)光(guang)染(ran)料Hoechst能少許進(jin)入正(zheng)(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo),使(shi)(shi)其染(ran)上(shang)低藍(lan)(lan)色(se),而凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)膜(mo)(mo)通(tong)透性增(zeng)強,因此進(jin)入凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)中(zhong)的(de)Hoechst比(bi)正(zheng)(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)多(duo),熒(ying)光(guang)強度 要比(bi)正(zheng)(zheng)常(chang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)中(zhong)要高,此外,凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)染(ran)色(se)體DNA的(de)結構發生了(le)改變從而使(shi)(shi)該染(ran)料能更有(you)效地(di)與DNA結合(he),并且凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)膜(mo)(mo)上(shang)的(de)p-糖(tang)蛋白泵功能受到損傷不 能有(you)效地(di)將(jiang)Hoechst排出到細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)外使(shi)(shi)之在細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)內積累增(zeng)加等都使(shi)(shi)凋(diao)亡(wang)(wang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)藍(lan)(lan)色(se)熒(ying)光(guang)增(zeng)強。
服務流程:
1、可貼壁(bi)細胞(bao)生長(chang)于含有蓋玻片的培養皿中,或將非貼壁(bi)細胞(bao)懸(xuan)浮培養;
2、將(jiang)HOECHST加入培養皿,終濃度為10ug/ml,37℃孵(fu)育30min;
3、加入4%PF,與培養液1:3混(hun)合,固定細胞5-10min;
4、固定后將長有細胞(bao)的蓋(gai)玻(bo)片(pian)(pian)用封片(pian)(pian)劑封于(yu)載玻(bo)片(pian)(pian);
5、熒(ying)光(guang)顯微鏡下(xia)觀察。
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入(ru)液氮或-80度保存,組織不(bu)少于(yu)100mg;
2、培養細胞:通(tong)過(guo)細胞計(ji)數取(qu)不少于2×106個細(xi)胞于EP管(guan),加入0.5ml生理鹽水或蛋(dan)白保(bao)護劑,混(hun)勻后保(bao)存(cun)于冰箱(-80℃,避免反復凍融);
3、血(xue)液細胞(bao)標本:以抗凝(ning)管保(bao)(bao)存(cun)血(xue)樣(yang)或(huo)以淋巴細胞(bao)分離液分離細胞(bao)后加入(ru)0.5ml生理鹽水(shui)或(huo)蛋白保(bao)(bao)護劑(ji),保(bao)(bao)存(cun)(-80℃可長期(qi)保(bao)(bao)存(cun),避免(mian)反復凍(dong)融);
4、血(xue)清或細胞(bao)培養液標(biao)本:離(li)心去掉雜質后取上清入(ru)EP管(guan),保存(cun)(cun)(4℃可保存(cun)(cun)15-20天,-80℃可長期保存(cun)(cun),避免反復凍融);
5、石蠟切(qie)片(pian)(pian),冰凍切(qie)片(pian)(pian)以及細胞爬(pa)片(pian)(pian),涂片(pian)(pian)等。
6、樣本運輸:可選擇以下任何一種方(fang)式寄送(song)標本
組(zu)織樣本、細(xi)胞樣本以干冰(bing)運輸或加(jia)入蛋白保護(hu)劑后,加(jia)冰(bing)袋寄送;
細胞樣本也(ye)可(ke)直接(jie)寄(ji)送培養(yang)瓶(密(mi)封保證不(bu)污(wu)染、培養(yang)液不(bu)漏(lou)出(chu));
血清或上清液直接加冰袋寄(ji)送(送視路程遠近2-3天可到達)。
 
收費標準/服務周期/提供結果:
我們會根據(ju)您的(de)方案及需求(qiu)制定詳(xiang)細的(de)服(fu)務協議。
【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,RNAi類,分(fen)子(zi)生物(wu)(wu)實驗(yan),病理(li)(li)(li)實驗(yan),免(mian)疫學(xue)實驗(yan),細胞實驗(yan),動物(wu)(wu)實驗(yan),蛋(dan)白(bai)(bai)組學(xue)實驗(yan)等,能夠進行藥效(xiao)學(xue)評價(jia)、毒理(li)(li)(li)學(xue)評價(jia)、細胞藥篩、動物(wu)(wu)建模、病理(li)(li)(li)檢測、蛋(dan)白(bai)(bai)組學(xue)、代謝組學(xue)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物(wu)(wu)信息學(xue)分(fen)析服務!

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