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染色質免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq

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更新時間: 2017-08-03

染色質免疫共沉淀(chip)/Chip assay/chip-seq
染(ran)色(se)質(zhi)免疫共沉淀技(ji)術(shu)主要應用于(yu)驗證及探尋體(ti)內(nei)環境中(zhong),蛋白質(zhi)和DNA的(de)直(zhi)接(jie)相互(hu)作用,旨在(zai)探索特定蛋白質(zhi)在(zai)DNA上(shang)的(de)特定結合序列,常在(zai)研(yan)究(jiu)轉錄(lu)調(diao)控以及組蛋白修飾(shi)中(zhong)被(bei)應用到。

產品介紹:

 

染色質免疫共沉淀(dian)

服務簡介(jie):

染(ran)色質免疫共沉淀技術主要應用于(yu)驗證及探尋體內環境中(zhong),蛋(dan)白(bai)質和DNA的(de)直接相互作用,旨在探索(suo)特(te)定蛋(dan)白(bai)質在DNA上的(de)特(te)定結合序列,常在研究轉錄調控以(yi)及組蛋(dan)白(bai)修飾中(zhong)被應用到。

服(fu)務原理:

在活細胞狀態下固定(ding)(ding)蛋白(bai)質-DNA復(fu)合(he)物,并將其隨機切斷(duan)為一(yi)定(ding)(ding)長度(du)范圍(wei)內的(de)(de)染色質小(xiao)片段,然(ran)后通(tong)過免疫(yi)學方(fang)法沉淀此復(fu)合(he)體,特異性地富集目的(de)(de)蛋白(bai)結合(he)的(de)(de) DNA 片段,通(tong)過對目的(de)(de)片斷(duan)的(de)(de)純化(hua)與(yu)檢測,從而獲得蛋白(bai)質與(yu) DNA 相互(hu)作用的(de)(de)信息。

服務(wu)優勢:

完善(shan)的(de)實驗平臺:全進口的(de)儀器試(shi)劑,高標準甲醇(chun)交聯、Bioruptor超聲打斷;
2. 專業的實驗流程(cheng):*的ChIP優(you)化(hua)流程(cheng),個(ge)性化(hua)實驗方案,IP效率高,高成功率(高于95%);
3. 豐(feng)富的(de)實(shi)驗經驗:專業的(de)ChIP服務部門,實(shi)驗人(ren)員從事ChIP實(shi)驗長達5年(nian)以上,上千(qian)次成功(gong)ChIP實(shi)驗經驗,針對不(bu)同動(dong)植物組織有不(bu)同的(de)前處理(li)方式。
服務(wu)流程:
1、樣品準備(bei):培養細胞(若(ruo)樣(yang)品(pin)為組織(zhi),可先培養原(yuan)代細胞);固定,或者(zhe)直接(jie)活細胞送樣(yang)。
2、細胞固定:此步(bu)驟目的(de)為將結(jie)合在(zai)DNA上(shang)的(de)蛋白用共(gong)價(jia)形式交(jiao)聯在(zai)所(suo)結(jie)合的(de)位(wei)點(dian)上(shang),避免在(zai)之后(hou)的(de)操(cao)作步(bu)驟中脫離丟失。直接將甲(jia)醛(quan)加入細胞培養液,搖晃固定10分鐘(zhong)后(hou),迅速加入2.5M甘氨(an)酸解交(jiao)聯5分鐘(zhong),PBS洗滌,刮下細胞。
3、超聲打碎: 此(ci)步驟目(mu)的為將長鏈的DNA打碎成200-1000bp的DNA片(pian)段。使用設備是超聲水浴鍋(guo),EP管(guan)在冰水混合物(wu)中超聲,超聲后(hou)細胞懸液變得澄清透(tou)明。離心取上(shang)清。
4、免疫(yi)沉淀:此步驟是(shi)加入特(te)(te)異性抗(kang)體(ti)和對照IgG,和結合抗(kang)體(ti)的磁珠(zhu)(zhu)(或(huo)protein A/G)。經稀釋后,超聲(sheng)產物(wu)分(fen)成兩份,分(fen)別加入特(te)(te)異性抗(kang)體(ti)和對照IgG,輪(lun)轉過夜,第二天加入磁珠(zhu)(zhu)輪(lun)轉4小時。
5、洗滌:此步驟(zou)是減少非特(te)異性結(jie)合。分別(bie)用(yong)稀釋緩沖液(ye)、低鹽溶液(ye)、高(gao)鹽溶液(ye)、氯化鋰溶液(ye)以(yi)及TE緩沖液(ye)洗滌共7次。用(yong)洗脫(tuo)緩沖液(ye)在(zai)65℃洗脫(tuo)過夜。
6、DNA純化:將洗脫的產物用(yong)DNA純化試(shi)劑盒純化,得到50ul純化產物,用(yong)于檢測ChIP結果。

 

收費標準/服務(wu)周期/提(ti)供結果(guo):
詳談,我們(men)會根據您的方案及需求制(zhi)定詳細的服(fu)務協議。

【本公司合作項(xiang)目】
慢病(bing)毒,腺病(bing)毒,RNAi類,分(fen)子生物(wu)(wu)實(shi)(shi)驗(yan),病(bing)理實(shi)(shi)驗(yan),免疫學實(shi)(shi)驗(yan),細胞實(shi)(shi)驗(yan),動物(wu)(wu)實(shi)(shi)驗(yan),蛋(dan)白組學實(shi)(shi)驗(yan)等,能夠進行藥效學(xue)評價、毒理學(xue)評價、細胞藥篩、動物(wu)建模、病理檢測、蛋白(bai)組學(xue)、代謝組學(xue)、高通量(liang)測序、ChIP、CO-IP、生物(wu)信(xin)息學(xue)分析(xi)服務(wu)!

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