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免疫共沉淀(CO-IP)/CO-IP/免疫共沉淀

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更新時間: 2017-08-03

免疫共沉淀(CO-IP)/CO-IP/免疫共沉淀
以抗體(ti)和抗原之間(jian)的專一性作(zuo)用(yong)(yong)為基礎的用(yong)(yong)于研究(jiu)蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)相(xiang)互作(zuo)用(yong)(yong)的經典方(fang)法,當細(xi)胞在(zai)(zai)非(fei)變性條件下(xia)被裂解時,完(wan)整(zheng)細(xi)胞內(nei)存在(zai)(zai)的許(xu)多蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)-蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)間(jian)的相(xiang)互作(zuo)用(yong)(yong)被保留了下(xia)來(lai)。如果用(yong)(yong)蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)x的抗體(ti)免(mian)疫沉淀(dian)x,那么與x在(zai)(zai)體(ti)內(nei)結合的蛋(dan)白(bai)(bai)質(zhi)y也能沉淀(dian)下(xia)來(lai)。

產品介紹:

 

免疫共沉淀

服務目的:

測定(ding)(ding)兩(liang)種目的蛋白質是否在(zai)細胞(bao)內(nei)結(jie)合;也(ye)可用(yong)于測定(ding)(ding)確定(ding)(ding)某種特定(ding)(ding)蛋白質的新(xin)的作(zuo)用(yong)搭檔。
服務原理:

以(yi)抗體和(he)抗原(yuan)之間的(de)(de)(de)專一性作用(yong)(yong)(yong)為(wei)基(ji)礎的(de)(de)(de)用(yong)(yong)(yong)于研究蛋白(bai)質(zhi)相互(hu)作用(yong)(yong)(yong)的(de)(de)(de)經(jing)典方法,當細(xi)胞(bao)(bao)在(zai)非變性條件下(xia)被(bei)裂(lie)解時,完整細(xi)胞(bao)(bao)內存在(zai)的(de)(de)(de)許多蛋白(bai)質(zhi)-蛋白(bai)質(zhi)間的(de)(de)(de)相互(hu)作用(yong)(yong)(yong)被(bei)保留了(le)下(xia)來(lai)。如果用(yong)(yong)(yong)蛋白(bai)質(zhi)x的(de)(de)(de)抗體免疫沉淀(dian)x,那(nei)么與x在(zai)體內結(jie)合的(de)(de)(de)蛋白(bai)質(zhi)y也能沉淀(dian)下(xia)來(lai)。
服務(wu)材料:
試劑:蛋白提取試劑(ji)(ji)盒、非(fei)離子變性劑(ji)(ji)(NP-40、TritonX-100)、PBS、TBS、相應的IgG、Protein A 或Protein G瓊(qiong)脂糖凝膠珠、SDS-PAGE電泳、上(shang)樣緩沖(chong)液。
儀器:振(zhen)蕩器、蛋白電泳儀、恒(heng)溫箱、脫色搖床。

服(fu)務流程:
1)用其特定(ding)蛋白的抗(kang)體與(yu)ProteinA/G相結(jie)(jie)合(he)(Flag IP Kit已結(jie)(jie)合(he)上);
2)用抗(kang)體成點特(te)定蛋白,特(te)定蛋白已(yi)結合了與其相互(hu)作用蛋白;
3)通(tong)過洗(xi)滌得到純(chun)復合(he)蛋(dan)白(bai)后用感興趣蛋(dan)白(bai)抗(kang)體通(tong)過WB方(fang)法檢測其IP結果(guo);
4)提交WB圖與分析結(jie)果和實驗報(bao)告。
服務方法:
1、蛋(dan)白樣(yang)品準備(bei)。收集細胞或組(zu)織,在非變性條件下裂解細胞,釋(shi)放(fang)蛋(dan)白。
2、選做去除非特異性結合。取待測樣品,選用和免疫(yi)共(gong)沉淀時使用的(de)IgG種屬相同的(de)普通IgG與瓊脂糖凝膠(jiao)珠混合,4oC慢搖30min-2h。離心取上清。
3、免疫共沉淀。加一抗(kang),4oC慢搖過(guo)夜(ye)。加瓊脂糖(tang)凝膠珠,4oC慢(man)搖1~3h。瞬時離心棄上清。PBS洗(xi)沉淀5次(ci)。
4、加電(dian)泳上樣(yang)緩(huan)沖液,煮沸用于SDS-PAGE電(dian)泳。

 

收費(fei)標準/服務周期(qi)/提供結果:
詳談,我們會根(gen)據(ju)您的(de)(de)方案及需求制定詳細的(de)(de)服務協議。

【本公司合作項目】
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