細胞成骨誘導
成骨誘導培養(yang)液(ye)配備與誘導操作：
1、準備(bei)含10%FBS的(de)α-MEM培養液；
2、在備好的α-MEM培養液中添加(jia)50μM 抗(kang)壞血酸, 10mmβ-磷酸甘油和100nm地塞米松；
3、準(zhun)備6孔培養板，將(jiang)P4細胞按照5×103個/平方厘米的規格接種于原始α-MEM培養液中；
4、待(dai)細胞長至基本融(rong)合后，更(geng)換上述制備完成(cheng)的成(cheng)骨誘導培養液(ye)；
5、每(mei)三天換(huan)液一次，細胞長至7天時(shi)進行堿性磷酸酶(mei)染色； ;
6、二十八天后再進行礦(kuang)化結節(jie)的茜素紅染色。
素紅染色方(fang)法介(jie)紹(shao)：
1、去除細胞當前使(shi)用培養液，使(shi)用PBS清(qing)洗兩次；
2、使用10%甲醛室溫(wen)固定15分鐘，完成后(hou)使用重(zhong)蒸餾水沖洗(xi)兩次(ci)；
3、按照1ml/孔加入40mM的茜素紅(hong)染(ran)色液，室(shi)溫孵(fu)育20min并輕微振(zhen)蕩；
4、清除(chu)掉沒有*結合的(de)染料，用重蒸餾水漂(piao)洗并振蕩(dang)5min重復(fu)4次；
5、傾斜放置2min,吸取(qu)多余(yu)的重(zhong)蒸餾水；倒置顯(xian)微鏡觀察拍照記(ji)錄。
實驗注(zhu)意事(shi)項(xiang)：
客(ke)戶提供：
細胞種(zhong)類(lei)和誘導分化細胞類(lei)型(xing)。
收費標準/服(fu)務周期/提供結果：
詳(xiang)談，我們(men)會根據您的方(fang)案及需求制定(ding)詳(xiang)細(xi)的服務(wu)協議。
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