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克隆形成實驗

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更新時間: 2017-08-02

克隆形成實驗
當(dang)單個細胞(bao)在(zai)體外增(zeng)殖(zhi)6代(dai)以上(shang),其后代(dai)所組(zu)成(cheng)(cheng)的(de)細胞(bao)群體,成(cheng)(cheng)為集落或克(ke)(ke)隆(long)。每個克(ke)(ke)隆(long)含有50以上(shang)的(de)細胞(bao),大(da)小在(zai)0.3-1.0mm之間。集落形(xing)成(cheng)(cheng)率(lv)表示細胞(bao)的(de)獨立生(sheng)存能(neng)(neng)力(li)(li)。各種理化因(yin)素可(ke)能(neng)(neng)導致細胞(bao)的(de)克(ke)(ke)隆(long)形(xing)成(cheng)(cheng)能(neng)(neng)力(li)(li)發(fa)生(sheng)改變(bian)。通(tong)過一定的(de)實(shi)驗方法可(ke)以對細胞(bao)的(de)克(ke)(ke)隆(long)形(xing)成(cheng)(cheng)能(neng)(neng)力(li)(li)進行檢測。

產品介紹:

克隆形成實驗

實驗介紹 :
當單個(ge)細胞在體外增(zeng)殖(zhi)6代(dai)以(yi)上,其后代(dai)所組成的細胞群(qun)體,成為集落或克(ke)隆。每個(ge)克(ke)隆含有50以(yi)上的細胞,大小在0.3-1.0mm之間。集落形成率表示(shi)細胞的獨立生存能(neng)力。各種理(li)化(hua)因素可能(neng)導致細胞的克(ke)隆形成能(neng)力發(fa)生改(gai)變。通過一定的實驗方法可以(yi)對細胞的克(ke)隆形成能(neng)力進(jin)行(xing)檢(jian)測。
實驗(yan)方法(fa):
平(ping)板集(ji)落形成(cheng)實驗、軟瓊脂集(ji)落形成(cheng)實驗
 (a) 平板集(ji)落形成(cheng)實驗:本法適用(yong)于(yu)貼壁生長的(de)(de)細(xi)胞(bao)和正常培(pei)養的(de)(de)細(xi)胞(bao)
 (b) 軟瓊(qiong)脂集(ji)落形(xing)成實驗:本(ben)法適(shi)用于(yu)非錨著依賴性生(sheng)長的細(xi)胞,如骨髓造血干細(xi)胞、腫瘤細(xi)胞株、轉化細(xi)胞系(xi)。
注意事項:
 (a) 瓊(qiong)脂對熱和酸(suan)不穩定(ding),若反復加熱,容易降解(jie)而產(chan)生毒性,且硬度(du)下降。因此高壓(ya)滅菌(jun)后應進行分裝(zhuang);
 (b) 細胞在進行克隆形成實驗時要求有95%以上的分散度,否則結果的準確度會受到很大影響;
 (c) 軟(ruan)瓊脂(zhi)與細胞混合(he)時(shi)溫度(du)不(bu)能超過(guo)40℃,否則將會燙(tang)傷/死細胞;
 (d) 接種(zhong)時(shi)細(xi)胞密(mi)度適度,不可過(guo)高(gao)。
     細(xi)胞(bao)(bao)在低密度、非貼壁狀態條件下培(pei)養,生存率(lv)明顯下降,永生細(xi)胞(bao)(bao)系(xi)(xi)/株克(ke)隆(long)形成(cheng)率(lv)可達到10%以上(shang),但(dan)初(chu)代培(pei)養細(xi)胞(bao)(bao)和有(you)限(xian)傳代細(xi)胞(bao)(bao)系(xi)(xi)克(ke)隆(long)形成(cheng)率(lv)僅為0.5%-5%,甚至無法形成(cheng)單個克(ke)隆(long)。因此(ci),為了提高克(ke)隆(long)形成(cheng)率(lv),有(you)時需要在培(pei)養基中添(tian)加(jia)胰島素、地塞(sai)米松等促克(ke)隆(long)形成(cheng)物質。
細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)接(jie)種(zhong)(zhong)存活率(lv)只表示(shi)接(jie)種(zhong)(zhong)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)后貼(tie)壁(bi)(bi)的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)數,但貼(tie)壁(bi)(bi)后的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)不(bu)一定每個都能(neng)增殖和(he)形(xing)成(cheng)克(ke)隆。而(er)形(xing)成(cheng)克(ke)隆的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)必為貼(tie)壁(bi)(bi)和(he)有增殖活力(li)的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)。克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)反(fan)映細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)群體依賴性(xing)和(he)增殖能(neng)力(li)兩個重(zhong)要(yao)性(xing)狀(zhuang)。由(you)于細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)生物學性(xing)狀(zhuang)不(bu)同,細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)差別也很大,一般初代(dai)(dai)培養細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)弱,傳代(dai)(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)強(qiang);二倍體細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)弱,轉(zhuan)化細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)系(xi)強(qiang);正(zheng)常細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)弱,腫瘤細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)強(qiang)。并且克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)與接(jie)種(zhong)(zhong)密度有一定關系(xi),做(zuo)克(ke)隆形(xing)成(cheng)率(lv)測定時,接(jie)種(zhong)(zhong)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)一定要(yao)分散成(cheng)單細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)懸液,直接接種在碟(die)皿中,持續(xu)一周(zhou),隨時檢查,到(dao)細胞形成(cheng)克隆時終止(zhi)培養。

服務流(liu)程:
1、 討(tao)論分析實驗方案
2、 確定服務(wu)內(nei)容
3、 簽訂服務合同(tong)
4、 進行實驗,定期向客戶(hu)反饋
5、 整(zheng)理實驗(yan)報告
6、 完成合同內容
7、 后續實(shi)驗(yan)服務,進(jin)一步合作

 

收費標準(zhun)/服務周期/提供結果:
詳談(tan),我(wo)們會根據您(nin)的(de)方案及需求制(zhi)定詳細的(de)服務協議。

【本公司合(he)作項目】
慢(man)病毒(du)(du),腺病毒(du)(du),RNAi類,分子生(sheng)物實(shi)(shi)驗,病理實(shi)(shi)驗,免(mian)疫學實(shi)(shi)驗,細胞實(shi)(shi)驗,動物實(shi)(shi)驗,蛋白組學實(shi)(shi)驗等(deng),能夠進行(xing)藥(yao)效學評價、毒(du)理學評價、細(xi)胞藥篩、動物(wu)建模、病理檢測、蛋白組學、代謝組學、高(gao)通量測序、ChIP、CO-IP、生物(wu)信(xin)息(xi)學分析服務!

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