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| 更新時間： | 2017-08-02 |
腫(zhong)瘤細胞在體外(wai)仍具有(you)遷移(yi)的(de)(de)能(neng)力。細胞劃(hua)痕法是測定(ding)了(le)腫(zhong)瘤細胞的(de)(de)運(yun)動(dong)特性的(de)(de)方法之(zhi)一。其借(jie)鑒體外(wai)細胞致傷(shang)愈合(he)實驗模型(xing)，在體外(wai)培養的(de)(de)單層細胞上，劃(hua)痕致傷(shang)，然(ran)后比較不同實驗組中腫(zhong)瘤細胞遷移(yi)的(de)(de)能(neng)力。
細胞劃痕
服務原(yuan)理 ：
腫瘤細胞在體外仍具有遷移的能力。細胞劃痕法是測定了腫瘤細胞的運動特性的方法之一。其借鑒體外細胞致傷愈合實驗模型，在體外培養的單層細胞上，劃痕致傷，然后比較不同實驗組中腫瘤細胞遷移的能力。
服(fu)務(wu)流程：
1.細胞培養；
2.；
3.無(wu)血(xue)(xue)清/低血(xue)(xue)清培(pei)養；
4.顯(xian)微鏡觀察(cha)拍照；
5.計(ji)算(suan)遷(qian)移率。
實驗(yan)步驟 ：
實(shi)驗共分以(yi)下4個(ge)主(zhu)要步驟：
1. 質粒轉染細胞：
準備A549細胞(bao)(bao)，轉(zhuan)(zhuan)染(ran)前一天按照70-80%密度鋪(pu)在6cm培養皿(min)中。16h后(hou)，按照轉(zhuan)(zhuan)染(ran)試劑(ji)說明書轉(zhuan)(zhuan)染(ran)細胞(bao)(bao)（8μg質(zhi)粒，20μL lipofectamine 2000轉(zhuan)(zhuan)染(ran)試劑(ji)） 。轉(zhuan)(zhuan)染(ran)24h后(hou)，重新鋪(pu)盤，密度為30-40%。
2. 劃線；
待(dai)細胞*貼壁(bi)后，用200μL tip輕輕劃線，垂直90度，用力均勻，確保劃線處無細胞。
3. 細胞(bao)培養及拍照；
每隔3天換一次新鮮培(pei)養基。連續幾(ji)天倒置顯微(wei)(wei)鏡下(xia)100X下(xia)拍照(zhao)，記錄細(xi)(xi)胞(bao)的(de)遷移情況(kuang)，直到(dao)細(xi)(xi)胞(bao)填滿劃痕處。
4. 統計分析。
劃(hua)線(xian)兩側間(jian)距為average gaps（AGs），使用Image-Pro Plus軟(ruan)件分析各組細胞(bao)的(de)AGs。
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