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細胞侵襲

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更新時間: 2017-08-02

細胞侵襲
將細胞(bao)種于上(shang)室,趨化因子(zi)等種于下(xia)室,細胞(bao)會向營(ying)養成(cheng)分(fen)高的(de)下(xia)室跑。與(yu)遷移(yi)實驗不同是侵(qin)襲實驗需要在小室聚碳(tan)酸酯膜(mo)上(shang)鋪(pu)設(she)一層(ceng)基(ji)質(zhi)(zhi)膠(jiao)。用以模(mo)仿體內細胞(bao)外基(ji)質(zhi)(zhi),細胞(bao)欲進入下(xia)室,先要分(fen)泌基(ji)質(zhi)(zhi)金屬蛋白酶(MMPs)將基(ji)質(zhi)(zhi)膠(jiao)降解,方可通過聚碳(tan)酸酯膜(mo)。計數進入下(xia)室的(de)細胞(bao)量(liang)可反(fan)映腫瘤細胞(bao)的(de)侵(qin)襲能力。

產品介紹:

細胞侵襲

服務目的(de):

研究趨化因子或其他營養物質對細胞侵襲的影響
服(fu)務原理:

將細(xi)胞(bao)種于上(shang)室(shi)(shi),趨化因子(zi)等種于下(xia)(xia)室(shi)(shi),細(xi)胞(bao)會(hui)向營(ying)養成分(fen)高的(de)(de)下(xia)(xia)室(shi)(shi)跑。與(yu)遷移實(shi)驗不同是侵(qin)襲實(shi)驗需要在(zai)小室(shi)(shi)聚碳酸酯(zhi)膜(mo)上(shang)鋪設一層基(ji)質(zhi)膠。用以模仿(fang)體內(nei)細(xi)胞(bao)外基(ji)質(zhi),細(xi)胞(bao)欲進入下(xia)(xia)室(shi)(shi),先要分(fen)泌基(ji)質(zhi)金(jin)屬蛋(dan)白酶(MMPs)將基(ji)質(zhi)膠降解,方可通(tong)過聚碳酸酯(zhi)膜(mo)。計(ji)數進入下(xia)(xia)室(shi)(shi)的(de)(de)細(xi)胞(bao)量(liang)可反映腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)的(de)(de)侵(qin)襲能力。

客戶提(ti)供:

1.提供檢(jian)測(ce)樣本的樣本信(xin)息(xi)、檢(jian)測(ce)應(ying)用及檢(jian)測(ce)時間點等;

2.若客(ke)戶提供細(xi)胞(bao):25T細(xi)胞(bao)培養瓶,灌(guan)滿培養基(ji)新(xin)鮮運(yun)輸(shu)或(huo)提供細(xi)胞(bao)凍存管,干冰運(yun)輸(shu)

服務流程

  1. matrigel在4℃過夜融化
    2. 稀釋matrigel至終(zhong)濃度(du)1mg/ml
    3. 在(zai)chamber上室底部中央垂直加入稀釋后的(de)matrigel。37℃溫育4-5 h
    4. 所有細胞培(pei)養試劑和Transwell chamber放(fang)在37℃恒溫水浴箱溫育
    5. 消化培養(yang)至對(dui)數期的細胞,用無(wu)血清(qing)培養(yang)基懸浮(fu)細胞,計數,調整濃度(du)為5*105/ml
    6. 在下(xia)室(shi)加入含(han)20%血清的培養基。上室(shi)加入細胞(bao)懸液,37 ℃、5%CO2、飽和濕度條件(jian)下繼續培養24 h
    7. 取出chamber,吸干上室液體(ti),移到預(yu)先加入甲(jia)醇的孔中,室溫固定30min
    8. 取出(chu)chamber,吸干上室固定液(ye),移(yi)到(dao)預先加入結(jie)晶(jing)紫染液(ye)的孔中,室溫染色            15-30min;用(yong)PBS沖(chong)洗浸泡數次,取chamber,先用(yong)干棉簽將上(shang)室內液體吸去,再用(yong)棉簽輕輕擦Matrigel凝膠和(he)聚碳酯膜上(shang)表(biao)面的細胞
    9. 揭(jie)下膜表面(mian)上(shang)的(de)細胞,晾干,封片
    10. 顯(xian)微鏡(jing)下計(ji)數,統計(ji)結果;(若不用(yong)保存(cun)底膜,可省去步驟9)

 

收(shou)費標準(zhun)/服務(wu)周(zhou)期/提(ti)供結果:
詳(xiang)談,我們(men)會根據您的(de)方(fang)案(an)及(ji)需求制定詳(xiang)細(xi)的(de)服務協(xie)議。

【本公司(si)合作項目】
慢病毒,腺(xian)病毒,RNAi類,分(fen)子生物實(shi)驗(yan)(yan),病理實(shi)驗(yan)(yan),免疫(yi)學(xue)實(shi)驗(yan)(yan),細胞實(shi)驗(yan)(yan),動物實(shi)驗(yan)(yan),蛋白組學(xue)實(shi)驗(yan)(yan)等(deng),能夠進(jin)行(xing)藥(yao)效(xiao)學(xue)評價、毒(du)理學(xue)評價、細胞藥(yao)篩、動物(wu)建模(mo)、病理檢測、蛋(dan)白組學、代(dai)謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物(wu)信息學分析(xi)服務(wu)!

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