線粒體膜電(dian)位檢(jian)測
服務介紹:
線粒體(ti)膜電位(wei)(wei)檢(jian)測試劑(ji)盒(he)(JC-1)是一(yi)種以(yi)JC-1 為熒光探針,快速靈(ling)敏地檢(jian)測細胞(bao)、組織或純化(hua)的線粒體(ti)膜電位(wei)(wei)變化(hua)的試劑(ji)盒(he),可以(yi)用于早期的細胞(bao)凋(diao)亡檢(jian)測。
服務(wu)目的:
通過檢測線粒體膜(mo)電(dian)位(wei)變化鑒定樣(yang)品的凋亡(wang)情(qing)況
服務(wu)原理:
JC-1為陽離子(zi)脂質(zhi)熒光(guang)(guang)染料(liao),有(you)單體(ti)和多(duo)聚體(ti)兩種存(cun)在狀態(tai),兩者的發(fa)射(she)光(guang)(guang)譜不同(tong)。正(zheng)常(chang)健康線粒(li)體(ti)的膜電位(wei)(△y)具有(you)極(ji)性,JC-1依賴于(yu)(yu)△y的極(ji)性被迅速攝入(ru)線粒(li)體(ti)內,并因濃度增高而(er)在線粒(li)體(ti)內形成(cheng)多(duo)聚體(ti),多(duo)聚體(ti)發(fa)射(she)光(guang)(guang)為紅(hong)色熒光(guang)(guang);而(er)細胞(bao)發(fa)生凋亡時,線粒(li)體(ti)跨膜電位(wei)被去(qu)極(ji)化,JC-1從線粒(li)體(ti)內釋(shi)放,紅(hong)光(guang)(guang)強度減弱,以單體(ti)的形式存(cun)在于(yu)(yu)胞(bao)質(zhi)內,發(fa)綠色熒光(guang)(guang)。
服務流程:
1、細(xi)胞(bao)(bao)重懸于0.5mL 細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養液中,細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養液中可(ke)以含血清(qing)和酚紅。;
2、用適當的方(fang)法(fa)誘(you)導細(xi)胞凋亡,同時設(she)立陰性依照(zhao)組合陽性對照(zhao)組,收集細(xi)胞;
3、用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的(de)細胞;
4、加入0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中37℃孵育20 分鐘(zhong)。
5、在孵(fu)育期間,按(an)照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸(zheng)餾水的比例(li),配(pei)制(zhi)適(shi)量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
6、37℃孵育結(jie)束后,600g 4℃離(li)心(xin)3~4 分鐘,沉淀細胞(bao)。棄上(shang)清,注意盡量不(bu)要吸除細胞(bao)。
7、用JC-1 染(ran)色緩沖(chong)液(1×)洗滌(di)2 次:加入1mL JC-1 染(ran)色緩沖(chong)液(1×)重(zhong)懸細(xi) 胞(bao),600g 4℃離(li)(li)心3~4 分(fen)鐘(zhong),沉淀細(xi)胞(bao),棄上(shang)清。再加入1mL JC-1 染(ran)色緩沖(chong)液(1×)重(zhong)懸細(xi)胞(bao),600g4℃離(li)(li)心3~4 分(fen)鐘(zhong),沉淀細(xi)胞(bao),棄上(shang)清。
8、再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重(zhong)懸(xuan)后,用流式細胞(bao)儀分析。
服務說(shuo)明:
1、檢(jian)測細胞(bao)株(若實驗室有,可共享)。
2、待測毒性藥(yao)物(wu)(根據實驗方案有無)。
3、實(shi)驗(yan)設計方案或參考文獻。
4、若另有疑(yi)問歡迎(ying)向(xiang)本(ben)公司咨詢,我(wo)們將竭(jie)誠為(wei)您服務。
收費標(biao)準(zhun)/服(fu)務周(zhou)期/提供結果:
詳(xiang)談,我們(men)會根(gen)據您的方案及需求(qiu)制定詳(xiang)細的服務協(xie)議。
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線粒體膜電位檢測(JC-1)/膜電位(wei)檢(jian)測
線粒體膜電位檢測(JC-1)/膜(mo)電位檢測(ce)
線粒體膜電位檢測(JC-1)/膜(mo)電位檢測