Edu細胞增殖(zhi)檢(jian)測(ce)
EdU可以在DNA復制的(de)時候摻(chan)入到(dao)新(xin)合(he)(he)成的(de)DNA鏈中,通(tong)過一個“Click”反應,把(ba)熒(ying)光基(ji)團標(biao)記到(dao)新(xin)合(he)(he)成的(de)含有EdU的(de)DNA上面,這(zhe)樣(yang)我(wo)們就能通(tong)過檢(jian)測(ce)熒(ying)光而知道(dao)細(xi)胞的(de)增殖情況了(le)。
操作步(bu)驟(zou)
1. 細(xi)胞(bao)培養:取對數生長期(qi)細(xi)胞(bao),以每孔(kong)4×103~1×105細(xi)胞(bao)接(jie)種于96孔(kong)板中,培養至正(zheng)常生長階(jie)段
2. 藥物(wu)(wu)處理:根據實(shi)驗需要進行各種藥物(wu)(wu)處理
3. EdU標記:用細胞培養基按1000:1的比例(li)稀釋EdU溶液 (試(shi)劑A),制(zhi)備適量50μM EdU培養基;
注:1)EdU濃(nong)度與孵(fu)育(yu)時(shi)間(jian)相(xiang)關(guan),短時(shi)間(jian)孵(fu)育(yu)(<2h)宜采用(yong)(yong)高濃(nong)度(10~50 μM),長時(shi)間(jian)孵(fu)育(yu)(>24h)宜采用(yong)(yong)低濃(nong)度 (1~10μM);
a.如果(guo)需(xu)配置(zhi)10μM EdU培(pei)養(yang)基,需(xu)調整為5000:1稀釋(shi)比例;
b.配置好(hao)的(de)培養基的(de)保存時間取決于培養基的(de)性質。
4. 細(xi)胞固定
5. Apollo染色
6. 圖像獲(huo)取及分析
客戶提供
1.提供新鮮的肝素(su)或者EDTA抗(kang)凝的外周血;
2.提(ti)供新(xin)鮮的培養細(xi)胞,提(ti)供新(xin)鮮組織,需(xu)要(yao)實驗室制備(bei)成單細(xi)胞懸液。
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Edu細(xi)胞增殖檢測/細(xi)胞增殖實驗
Edu細胞(bao)增殖檢測/細胞(bao)增殖實驗
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