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細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

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更新時間: 2017-08-02

細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染
細胞(bao)轉染(ran)的基本原(yuan)理將外源DNA克隆到載體上后導入細胞(bao),借助(zhu)宿主細胞(bao)表達載體上的目的片段,從而(er)使目的基因在細胞(bao)中(zhong)發(fa)揮功能(neng)。目前轉染(ran)方法(fa)有(you)多(duo)種,如脂質體轉染(ran)法(fa)、磷酸(suan)鈣-DNA共沉(chen)淀法(fa)、電穿孔轉染(ran)法(fa)、腺病(bing)毒感染(ran)等。

產品介紹:

 

細(xi)胞瞬時轉染

服務簡介:

     細(xi)胞(bao)轉染的(de)(de)基(ji)本原理將(jiang)外源DNA克隆到載體上(shang)后(hou)導入細(xi)胞(bao),借(jie)助宿主細(xi)胞(bao)表達載體上(shang)的(de)(de)目(mu)的(de)(de)片段,從而使目(mu)的(de)(de)基(ji)因在細(xi)胞(bao)中(zhong)發揮功能。目(mu)前轉染方法(fa)(fa)有多種,如脂(zhi)質體轉染法(fa)(fa)、磷(lin)酸鈣(gai)-DNA共沉淀(dian)法(fa)(fa)、電穿孔轉染法(fa)(fa)、腺病毒感染等。
      常規轉染(ran)(ran)(ran)技術(shu)可(ke)分為兩大(da)類,一(yi)類是(shi)瞬(shun)時(shi)轉染(ran)(ran)(ran),另一(yi)類是(shi)穩(wen)定(ding)轉染(ran)(ran)(ran),前(qian)者轉染(ran)(ran)(ran)的(de)外(wai)源DNA不整(zheng)合到宿主染(ran)(ran)(ran)色(se)體中,通(tong)常表(biao)達(da)只持(chi)續(xu)幾天(tian),一(yi)般(ban)在轉染(ran)(ran)(ran)24-72小(xiao)時(shi)后檢測。后者轉染(ran)(ran)(ran)的(de)外(wai)源DNA將整(zheng)合到宿主染(ran)(ran)(ran)色(se)體中,可(ke)持(chi)續(xu)性表(biao)達(da),一(yi)般(ban)可(ke)用于穩(wen)定(ding)細胞株的(de)構建(jian)。
     本(ben)公司使(shi)用商用化的lipofectamine2000作為(wei)轉染試劑(ji),所有實(shi)(shi)驗步驟及試劑(ji)按照廠家建議的用量(liang)。實(shi)(shi)驗中使(shi)用轉染試劑(ji)在常溫條(tiao)件下(xia)同待轉染質粒(li)/RNA在培(pei)(pei)養基(ji)中組(zu)裝(zhuang)成復合體,按照一(yi)定的比(bi)例將上述裝(zhuang)配產物加入到對數生長期的細胞中。待培(pei)(pei)養一(yi)段時間(jian)后,可結合下(xia)游實(shi)(shi)驗檢測項(xiang)目。

 服務流程:

  1. 質(zhi)粒:
    a. 進(jin)行預實(shi)驗,通過(guo)轉(zhuan)染含有報告基因的質粒優化轉(zhuan)染條件;
    b. 轉染條件確定(ding)后,按(an)照(zhao)客戶方案(an)進(jin)行轉染;
    c. qPCR或Western Blot檢測轉染效率。
    (2)SiRNA:
    a. 根據基因序列(lie),設計并合(he)成(cheng)siRNA;
    b. 進行預實驗(yan),通(tong)過(guo)轉(zhuan)染帶有熒光標(biao)記(ji)的陰性對照siRNA優化轉(zhuan)染條(tiao)件;
    c. 通(tong)過qPCR和Western Blot驗證(zheng)siRNA的沉(chen)默效率,篩選(xuan)siRNA*使用濃度(du)。

客(ke)戶提供:
待轉染細(xi)胞株及細(xi)胞培(pei)養的(de)(de)相關信息,待轉染的(de)(de)質粒信息,目的(de)(de)蛋白一抗;待轉染的(de)(de)SiRNA,預測被(bei)調控基因的(de)(de)蛋白的(de)(de)抗體。
交(jiao)付內容:
瞬(shun)時轉染的實(shi)驗(yan)報告單,含實(shi)驗(yan)原始實(shi)驗(yan)圖片、實(shi)驗(yan)方法、siRNA序列等(deng)。

收費標(biao)準/服務(wu)周期/提供(gong)結果:
詳談,我們會根據您的(de)方案及(ji)需求制定詳細的(de)服務協議。

【本公司合作項目(mu)】
慢病毒,腺病毒,RNAi類(lei),分子生物實(shi)驗(yan),病理實(shi)驗(yan),免疫學實(shi)驗(yan),細胞實(shi)驗(yan),動物實(shi)驗(yan),蛋白組學實(shi)驗(yan)等,能夠(gou)進(jin)行藥效學評價、毒理學評價(jia)、細胞藥(yao)篩(shai)、動物建模、病(bing)理檢(jian)測、蛋白組學(xue)、代謝組學(xue)、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學(xue)分(fen)析服務!

詳情請咨(zi)詢:

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細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

細胞瞬時轉染/瞬時轉染/轉染

 

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