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更新時間: | 2017-08-02 |
外泌體提取/外泌體外泌體是(shi)一類(lei)幾(ji)乎(hu)所有(you)類(lei)型的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)都(dou)能(neng)分泌的(de)(de)大小介于30-150nm的(de)(de)含(han)有(you)RNA和蛋白(bai)質(zhi)(zhi)等物質(zhi)(zhi)的(de)(de)微小囊泡(pao)結構,廣泛(fan)存在于各種體液中參(can)與調控重(zhong)要的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)理(li)活(huo)動。Exosome攜帶蛋白(bai)質(zhi)(zhi)包(bao)括(kuo)源細(xi)(xi)胞(bao)非特(te)(te)異性和源細(xi)(xi)胞(bao)特(te)(te)異性兩類(lei)蛋白(bai)分子。
外泌體(ti)提取
服務簡介:
外泌體是一(yi)類(lei)幾乎所有類(lei)型(xing)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)都(dou)能(neng)(neng)分泌的(de)大小(xiao)介于(yu)30-150nm的(de)含有RNA和(he)(he)蛋白質等物(wu)質的(de)微小(xiao)囊泡結構,廣泛存在(zai)于(yu)各(ge)種體液(ye)中參與(yu)(yu)調(diao)控重要(yao)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)(sheng)理活動。Exosome攜帶蛋白質包括(kuo)源(yuan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)非特(te)異性和(he)(he)源(yuan)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)特(te)異性兩類(lei)蛋白分子(zi)。前者可能(neng)(neng)與(yu)(yu)exosome的(de)生(sheng)(sheng)物(wu)發生(sheng)(sheng)和(he)(he)生(sheng)(sheng)物(wu)學作用有關,另一(yi)類(lei)是特(te)殊(shu)蛋白質,這類(lei)蛋白質只(zhi)存在(zai)于(yu)某種特(te)殊(shu)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)分泌的(de)exosome,而這些特(te)定細(xi)(xi)(xi)胞(bao)源(yuan)的(de)exosome與(yu)(yu)其(qi)生(sheng)(sheng)物(wu)學功能(neng)(neng)有著密切(qie)。包含的(de)RNA大部(bu)分為miRNA,其(qi)余為rRNA、lncRNA、DNA和(he)(he)其(qi)他(ta)RNA。
服務流程:
1、樣品(pin)收集處理
2、外泌體提取、質檢
3、RNA抽提、質檢
4、高(gao)通量測序
5、標準(zhun)信(xin)息分析
6、高級信息分析(xi)
7、表達(da)差異分析和定(ding)制化信息分析
服務(wu)要求(qiu):
1、準備新鮮或凍存(cun)(cun)的血液上清液置于(yu)冰上。如果樣品(pin)是(shi)凍存(cun)(cun)的,放置于(yu)25-37 ℃水浴(yu)鍋直至血液*溶解后,置于(yu)冰上。
2、小心將血(xue)液(ye)上清液(ye),過(guo)0.45um濾膜(mo),收(shou)集過(guo)濾液(ye)。
服務流(liu)程:
1、吸取0.5ml的血液到一(yi)干凈的管(guan)子,56℃水浴15分鐘
2、4 ℃ 12000rpm離(li)心5分鐘,取(qu)上(shang)清(qing)至新(xin)的離(li)心管
3、向(xiang)該離心管中(zhong)分別(bie)加入(ru)0.05ml的提(ti)取液(ye)1和0.05ml的提(ti)取液(ye)2。
4、上下顛倒管子(zi)或用移液槍吹打,直至血液上清液和提取液*混勻(yun)。
5、在冰上孵育2小(xiao)時。
6、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘(zhong)。
7、小心,快(kuai)速吸去(qu)上清,加800ul的(de)提(ti)取液 3,用移液槍(qiang)反復吹打管底沉淀。
8、4 ℃ 12000rpm離心10分鐘。
9、小心,快速吸去(qu)上(shang)清,用30ul 重懸液吹(chui)打,溶解管底外泌(mi)體沉淀。
10、用于下游的蛋白(bai)、核(he)酸(suan)、和其(qi)他(ta)分(fen)析。未及時使用時,分(fen)裝后-80 ℃保存。
注意事項(xiang):
A、本試(shi)劑盒(he)不適用于從其他(ta)體(ti)液或細(xi)胞(bao)上清中分(fen)離外泌(mi)體(ti)。其他(ta)相關體(ti)液的外泌(mi)體(ti)提 取(qu)試(shi)劑盒(he)是根據不同 生物(wu)樣品進行(xing)了相應的提取(qu)優化,請分(fen)別(bie)訂購。
B、通常(chang)情況下,0.25-0.5ml血(xue)液就(jiu)能提(ti)供(gong)足夠(gou)的(de)外泌(mi)體樣品(pin)用于(yu)常(chang)用的(de)下游分析。
C、對于(yu)從(cong)大(da)體積(ji)的血(xue)液樣(yang)品中(zhong)(>5ml)分(fen)離(li)外泌體,建(jian)議按(an)照1ml/份進(jin)行相應的分(fen)裝,提(ti)取以確保充分(fen)的外泌體提(ti)取效率。
收費(fei)標準/服務周期/提供(gong)結果:
詳(xiang)談,我們(men)會根據您的方(fang)案及需求制定詳(xiang)細的服務協議。
【本公司合作項目】
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外泌體提取/外泌體
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