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| 更新時間： | 2017-08-02 |
傳代細胞培養/細胞培養傳(chuan)(chuan)代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)培(pei)養使用(yong)已成(cheng)功構(gou)建的(de)(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株，大量培(pei)養狀(zhuang)態良好的(de)(de)同種細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，并維持(chi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)種的(de)(de)延續。傳(chuan)(chuan)代(dai)培(pei)養是細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養常(chang)規操作之一，也是所有細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)生物學實驗的(de)(de)基礎。傳(chuan)(chuan)代(dai)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)根(gen)據細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)生長習性可分為(wei)貼壁(bi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和懸浮細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。
傳代細胞培養
服務原理：
傳(chuan)(chuan)代細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的培養使用已成功構建的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)株(zhu)，大量培養狀(zhuang)態良(liang)好的同(tong)種(zhong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，并維持細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)種(zhong)的延(yan)續。傳(chuan)(chuan)代培養是細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)培養常(chang)規操(cao)作之(zhi)一，也是所有細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)物學(xue)實驗的基礎(chu)。傳(chuan)(chuan)代細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)根據(ju)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的生(sheng)長(chang)習性可(ke)分(fen)為貼壁細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和懸浮(fu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)。
服務流程：
1.觀察培養基是否正常，細胞狀態如何，細胞密度如何，決定是否傳代。觀察時擰緊蓋子。
2.加熱PBS、versene、培養基，(提前做好) 瓶子不要倒著放，不要讓液體接觸到瓶塞。
3.打開超凈臺(先開風機，后開照明)，用75%乙醇清潔臺面，點燃酒精燈。不要把廢液缸拿出去倒，如果廢液太多，可以用其他容器先裝廢液。取小離心管一個，置于架子上。
4.取尖吸管、吸量管各一支，放置在的架上。放置的方式，注意吸管、吸量管前端都不要與架子接觸。
5.取待傳代的細胞。打開versene，用酒精燈外焰燒。燒吸管時距離酒精燈心遠些，不要把渣滓帶進去。把試劑拿入臺子的時候，盡量平穩，不要讓試劑碰到瓶口。
6.用吸量管吸取舊的培養基，置離心管中，吸量管加入versene，然后將versene瓶收起來。(加versene主要是為了將舊培養基洗去)。在離心管中間部分將液體加入。吸液體和加液體時都不要對著細胞。
7.打開胰酶，然后將versene棄掉。換新管，用尖吸管吸取適量胰酶加入。加胰酶后，盡快放平，使細胞消化時間*。
8.將細胞放入37度孵箱。放孵箱2min, 收胰酶，打開PBS. 之后拿出來鏡下隨時觀察。使用二次消化法，去除容器中殘余的細胞。別忘了用舊培養基中和。
9.取細胞，鏡下觀察消化情況。消化程度合適之后(細胞變圓，但不漂起)，用尖吸管棄去胰酶，取離心管中的培養基加入細胞，吹打，至所有細胞從培養皿底部脫落下來。用PBS洗細胞，versene對細胞有毒性，且不能被血清中和。然后吸取至離心管中，800 rpm離心5分鐘。
10.吸量管吸取適量培養基加入新的培養皿中。
11.細胞離心畢，用吸新培養基的管棄去上清，先把泡沫吸走。換吸量管吸取培養皿中培養基適量，加入離心管，小體積混勻，將細胞重懸，尖吸管吹勻。
12.擦計數板，用槍吸10ul的液體，計數。不要把槍伸到離心管內。
13.吸(xi)量管吸(xi)取(qu)細胞懸液，加入新的培養皿中。鏡下觀(guan)察，搖(yao)勻，放入37度孵育(yu)。收超凈臺(tai)。
科研和臨床應用：
傳代細胞細胞可用于所有細胞實驗，常用于進行細胞增殖、細胞凋亡、細胞侵襲和藥物實驗等多方面的研究。
客戶需提供：
所(suo)需培養(yang)的細胞或由(you)本公司(si)代購
收費標準/服務周期/提供結果：
詳談，我(wo)們會根據您的(de)方(fang)案及(ji)需求制定詳細的(de)服務協(xie)議。
【本公司合作項目】
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傳代細胞培養/細胞培養
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