產品介紹：

甲基(ji)化檢測BSP/MSP法(fa)

服(fu)務簡介：

DNA甲(jia)基(ji)(ji)化是表(biao)(biao)觀遺(yi)(yi)傳(chuan)(chuan)學的(de)(de)(de)(de)重要(yao)研究內容(rong)之一(yi)，它(ta)可(ke)以抑制基(ji)(ji)因(yin)的(de)(de)(de)(de)表(biao)(biao)達。甲(jia)基(ji)(ji)化通常發生在(zai)胞(bao)嘧(mi)啶(ding)的(de)(de)(de)(de)C5位(wei)(wei)，形成5-甲(jia)基(ji)(ji)胞(bao)嘧(mi)啶(ding)（5mC），甲(jia)基(ji)(ji)化的(de)(de)(de)(de)胞(bao)嘧(mi)啶(ding)多(duo)位(wei)(wei)于CpG島(dao)上(shang)。DNA甲(jia)基(ji)(ji)化在(zai)人的(de)(de)(de)(de)正(zheng)常發育、X染色體(ti)失活(huo)、衰老以及許(xu)多(duo)人類(lei)疾病（如發育畸形、癌癥、心(xin)血管疾病、糖尿(niao)病和神經心(xin)理失調等(deng)）過程中(zhong)發揮重要(yao)作(zuo)用，已(yi)經成為表(biao)(biao)觀遺(yi)(yi)傳(chuan)(chuan)學和表(biao)(biao)觀基(ji)(ji)因(yin)組(zu)學的(de)(de)(de)(de)重要(yao)研究內容(rong)。該方(fang)法為甲(jia)基(ji)(ji)化檢(jian)測(ce)的(de)(de)(de)(de)金(jin)標準，可(ke)定量檢(jian)測(ce)基(ji)(ji)因(yin)甲(jia)基(ji)(ji)化水(shui)平。基(ji)(ji)因(yin)組(zu)DNA經亞硫(liu)酸氫鹽(yan)處(chu)理后，設計BSP引物擴增目的(de)(de)(de)(de)片段(duan)，zui后對PCR產物進行克隆并選取10個轉化子序 列(lie)，即可(ke)確定所(suo)研究的(de)(de)(de)(de)CpG區域(yu)的(de)(de)(de)(de)甲(jia)基(ji)(ji)化頻率。目前，基(ji)(ji)因(yin)的(de)(de)(de)(de)甲(jia)基(ji)(ji)化研究主要(yao)結合亞硫(liu)酸氫鈉(na)處(chu)理和PCR技(ji)術，分(fen)為甲(jia)基(ji)(ji)化特異性PCR（Methylationspecific PCR,MSP）和硫(liu)化測(ce)序PCR（Bisulfite sequencing PCR, BSP）。

服務原理(li)：
 BSP：甲基(ji)化的胞嘧(mi)啶在亞(ya)硫酸(suan)氫鈉發(fa)生脫(tuo)氨基(ji)后不會(hui)轉變，用一對(dui)(dui)特異性引物擴增后測序，再與DNA原始序列比對(dui)(dui)確定(ding)甲基(ji)化位點(dian)。測序法克(ke)服(fu)了(le)只能(neng)針對(dui)(dui)單個位點(dian)檢測，并且這些(xie)位點(dian)必須是限制性內切酶識別位點(dian)的缺點(dian)，可以對(dui)(dui)任何基(ji)因序列的甲基(ji)化狀態(tai)進行檢測。

MSP: 原理是(shi)基(ji)(ji)(ji)于DNA經亞硫(liu)酸氫鈉處理后(hou)，所有未甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)的(de)胞嘧啶發生脫氨基(ji)(ji)(ji)變(bian)為尿嘧啶，而(er)甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)的(de)胞嘧啶則不(bu)變(bian)。基(ji)(ji)(ji)于這種(zhong)堿(jian)基(ji)(ji)(ji)的(de)改(gai)變(bian)，然(ran)后(hou)設計(ji)針對甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)和非甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)序列(lie)的(de)引(yin)物(wu)并進行聚合酶(mei)鏈反(fan)應(PCR)擴增(zeng)，zui后(hou)通過瓊脂糖(tang)凝膠電泳(yong)分析，確定(ding)與引(yin)物(wu)互補(bu)的(de)DNA序列(lie)的(de)甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)狀態。這種(zhong)方(fang)法(fa)適于研究中大量樣本的(de)DN***段，具有方(fang)便快(kuai)捷，靈(ling)敏度高的(de)優點(dian)，是(shi)目前較為常(chang)用(yong)的(de)甲基(ji)(ji)(ji)化(hua)(hua)檢測(ce)方(fang)法(fa)。

服務(wu)流程：
1、根(gen)據目的(de)(de)基因(yin)啟動子序(xu)列設計(ji)相應的(de)(de)引物；        

基(ji)因組(zu)DNA的提取和定量；

亞(ya)硫酸氫鈉(na)修(xiu)飾基因組DNA                 

修飾后DNA純化回收；

a.結合實時定量(liang)PCR的(de)qMSP
   b.BSP，對PCR產物(wu)進行測序并與(yu)未經處理的序列比(bi)較(jiao)；
6、數據(ju)處(chu)理                      

向(xiang)客戶(hu)提供數(shu)據分析結(jie)果與(yu)實驗報告。

收費標(biao)準/服務周期/提供結果(guo)：
詳(xiang)談，我們會(hui)根據您的方案及需求(qiu)制定(ding)詳(xiang)細的服(fu)務協議。

【本平臺合作項(xiang)目】
慢病(bing)(bing)毒，腺病(bing)(bing)毒，RNAi類，分子生(sheng)物實(shi)驗(yan)(yan)，病(bing)(bing)理實(shi)驗(yan)(yan)，免疫學實(shi)驗(yan)(yan)，細胞實(shi)驗(yan)(yan)，動(dong)物實(shi)驗(yan)(yan)，蛋白組學實(shi)驗(yan)(yan)等，能夠進行藥效學(xue)評(ping)價、毒理學(xue)評價、細胞(bao)藥篩、動物(wu)建(jian)模(mo)、病理檢測(ce)(ce)、蛋白(bai)組學、代(dai)謝組學、高通(tong)量測(ce)(ce)序(xu)、ChIP、CO-IP、生(sheng)物(wu)信息學分析服務(wu)！

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