產品介紹：

                            

miRNA過表達慢病(bing)毒構建(jian)

服務簡介：

    miRNA是一種(zhong)21－25nt長的(de)(de)單鏈小分子(zi)RNA, 是由具有發夾結構的(de)(de)約70-90個堿(jian)基大小的(de)(de)單鏈RNA前(qian)體(ti)經過Dicer酶加(jia)工(gong)后生成，miRNA具有高(gao)度的(de)(de)保守性(xing)、時(shi)序性(xing)和組織特(te)異(yi)性(xing).而且這種(zhong)特(te)異(yi) 性(xing)和時(shi)序性(xing)，決定了(le)組織和細胞的(de)(de)功能特(te)異(yi)性(xing)，表明miRNA在細胞生長和發育過程(cheng)的(de)(de)調節過程(cheng)中起(qi)多(duo)種(zhong)作用，因此miRNA的(de)(de)研究受到(dao)了(le)生物(wu)學(xue)家的(de)(de)廣泛關 注。

 服務流程：
1、慢病毒過(guo)表達(da)質粒載體的構建
設(she)計上(shang)下游特異性擴增(zeng)引(yin)物(wu)，同時引(yin)入(ru)酶(mei)切(qie)位點，PCR(采用(yong)高保真(zhen)KOD酶(mei)，3K內(nei)突變(bian)率為0%)從(cong)模板中（CDNA質粒(li)或(huo)者文庫(ku)）調取目的基因CDS區（coding sequence）連(lian)入(ru)T載(zai)體(ti)。將CDS區從(cong)T載(zai)體(ti)上(shang)切(qie)下，裝入(ru)慢病毒(du)過表達(da)質粒(li)載(zai)體(ti)。
2、慢(man)病(bing)毒(du)干擾質(zhi)粒載體(ti)的構建(jian)
合(he)成(cheng)miRNA對應的DNA頸環結(jie)構，退(tui)火(huo)后(hou)連(lian)入慢病(bing)毒干擾質(zhi)粒(li)載體(ti)
3、慢病(bing)毒載體的包裝與(yu)濃縮純化(hua)
制備慢病毒穿梭(suo)質(zhi)粒及其輔助包裝原件載(zai)體(ti)(ti)質(zhi)粒，三(san)種(zhong)質(zhi)粒載(zai)體(ti)(ti)分別(bie)(bie)進行高(gao)純度無內抽(chou)提，共轉(zhuan)染(ran)293T細(xi)胞，轉(zhuan)染(ran)后(hou)6 h 更換為*培養基，培養24和48h后(hou)，分別(bie)(bie)收集富含慢病毒顆粒的細(xi)胞上清液(ye)，病毒上清液(ye)通過超離心(xin)濃縮(suo)病毒。

客戶提供(gong)：
1、目的(de)基因(yin)的(de)序(xu)列信息(xi)；
2、病(bing)毒載體要求及(ji)選擇。

收費(fei)標準/服(fu)務周期/提供結果：
詳談(tan)，我們會根據您的方案及(ji)需求制定詳細的服務協議。

【本公司合作項目(mu)】
慢病(bing)毒，腺病(bing)毒，RNAi類，分(fen)子生物實(shi)(shi)驗，病(bing)理(li)實(shi)(shi)驗，免疫學(xue)實(shi)(shi)驗，細胞實(shi)(shi)驗，動(dong)物實(shi)(shi)驗，蛋白組學(xue)實(shi)(shi)驗等，能夠進行藥效學(xue)評價、毒理學(xue)評價、細胞藥篩、動物建模(mo)、病理檢測、蛋白組學(xue)、代謝組學(xue)、高通(tong)量(liang)測序、ChIP、CO-IP、生物信息(xi)學(xue)分析服務！

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