產品介紹：

microRNA實時(shi)定量PCR檢測服務

microRNA實時定量PCR/miRNA實時(shi)(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang)(liang)PCR/實時(shi)(shi)熒光(guang)定(ding)量(liang)(liang)PCR/QPCR

實(shi)(shi)時(shi)(shi)熒(ying)光定量(liang)(liang)PCR技術(shu)是(shi)在普(pu)通PCR反(fan)應(ying)體系(xi)中(zhong)加入熒(ying)光試劑，利用熒(ying)光信號(hao)實(shi)(shi)時(shi)(shi)檢測(ce)PCR進程，zui后通過(guo)(guo)標(biao)準曲線對未知(zhi)模板進行(xing)(xing)定量(liang)(liang)分(fen)析的(de)(de)方法。實(shi)(shi)時(shi)(shi)熒(ying)光定量(liang)(liang)PCR能夠專一、靈(ling)敏、快速、高重復性(xing)地(di)精確定量(liang)(liang)起始(shi)模板濃度(du)。成熟miRNA是(shi)由(you)21-25個核(he)苷酸組成的(de)(de)小RNA，由(you)于長度(du)太(tai)短，不能通過(guo)(guo)傳統(tong)的(de)(de)實(shi)(shi)時(shi)(shi)定量(liang)(liang)PCR進行(xing)(xing)檢測(ce)。本公司通過(guo)(guo)特殊設計的(de)(de)莖環結構的(de)(de)反(fan)轉(zhuan)錄引(yin)物，配合實(shi)(shi)時(shi)(shi)定量(liang)(liang)PCR引(yin)物及探針可以精確檢測(ce)微量(liang)(liang)樣品中(zhong)miRNA表(biao)達水平，也可以用終點(dian)PCR法定性(xing)檢測(ce)。

服務流程：
1.引物設計、合成
設計并合成(cheng)目的(de)miRNA的(de)莖環RT引物、PCR引物和檢(jian)測用熒光探(tan)針，并合成(cheng)該miRNA相應的(de)DNA寡核苷酸作為標準。
2.樣品RNA抽(chou)提
a．組(zu)織樣品：取適量（50～100mg）新(xin)鮮組(zu)織或正確保存的組(zu)織樣品，勻(yun)漿(jiang)后(hou)用PURELINK^TM試劑抽提RNA。
b．細胞樣品：取1×10⁶～1×10⁷細(xi)胞(bao)(bao)，PBS清洗細(xi)胞(bao)(bao)，吸(xi)去(qu)PBS后(hou)用(yong)PURELINK^TM試劑抽提(ti)RNA。
3.RNA質(zhi)量檢測(ce)
a．紫外吸(xi)收測定(ding)法測定(ding)RNA在波(bo)長260nm和280nm的(de)吸(xi)收值，獲得(de)RNA的(de)濃(nong)度(du)并通過A260/280及A260/230的(de)吸(xi)收比值判斷(duan)RNA的(de)純度(du)。
b．甲(jia)醛(quan)變性瓊(qiong)脂糖凝膠(jiao)電泳檢測RNA純(chun)度和完整性。
注：用(yong)于miRNA實(shi)時(shi)定量PCR檢(jian)測(ce)的(de)RNA樣(yang)品(pin)，必須高純度、完(wan)整，沒有(you)RNase 污(wu)染（降解的(de)樣(yang)品(pin)不能用(yong)于實(shi)時(shi)定量PCR檢(jian)測(ce)），同時(shi)提取方法必須保證所得(de)樣(yang)品(pin)包含完(wan)整的(de)小RNA部分。
4.逆轉錄(lu)合(he)成cDNA
利(li)用莖環引物逆轉錄合成cDNA*鏈。
5.實時定量PCR
以(yi)合成的cDNA作為模(mo)板進行(xing)實時定(ding)量(liang)PCR擴增，梯度(du)稀釋(shi)的標準同時進行(xing)實時定(ding)量(liang)PCR擴增，根據Ct值制備標準曲(qu)線(xian)。以(yi)同樣的方法(fa)測定(ding)每個樣品中(zhong)U6 snRNA含量(liang)作為內(nei)參.
6.分析結果(guo)、提供實驗(yan)報(bao)告
分(fen)析實時定量(liang)PCR結果(guo)，根據(ju)標準曲線定量(liang)樣品(pin)中的目(mu)的miRNA。提供實驗(yan)報(bao)告(gao)，包括詳細(xi)的實驗(yan)方法，實時定量(liang)PCR實驗(yan)數(shu)據(ju)和圖表(biao)。

收費標準/服務周期/提供結果：
詳談，我(wo)們會根據您的方案及需求制定詳細(xi)的服務(wu)協議(yi)。

【本公(gong)司(si)合(he)作項目】
慢病(bing)(bing)毒，腺(xian)病(bing)(bing)毒，RNAi類(lei)，分(fen)子生(sheng)物(wu)實(shi)(shi)驗，病(bing)(bing)理實(shi)(shi)驗，免疫學(xue)實(shi)(shi)驗，細胞實(shi)(shi)驗，動物(wu)實(shi)(shi)驗，蛋白(bai)組學(xue)實(shi)(shi)驗等，能夠進行藥效學(xue)評(ping)價、毒理學(xue)評價(jia)、細胞藥篩、動物(wu)建模、病理檢測、蛋白組(zu)學、代謝組(zu)學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物(wu)信息(xi)學分(fen)析服務！

詳情請咨詢：

【公(gong)司】www.mxbio。。ｃｎ
【】
【技術咨(zi)詢】
【公司】shmxbio
【公司(si)地址】上海市閔行區滄源路1200號2218室